在蛋白电泳实验中，烧胶问题堪称“隐形实验杀手”。它不仅会导致溴酚蓝带扭曲变形、胶体局部发黄，更会使蛋白质条带模糊、分离失败，甚至前功尽弃。其实，烧胶并非无法预防——只要从缓冲液配制、用量控制、温度调节这三个核心环节入手，并理解其背后的原理，就能显著提升电泳成功率。下面我们将逐一展开，为你提供既实用又深入的操作指南。
电泳缓冲液不是“大概配配就行”，其浓度直接关系到体系的缓冲能力。浓度过低时，阳极端的缓冲液在电泳过程中无法有效维持pH稳定，氢离子积累导致pH快速下降，局部过热从而烧胶。
进阶建议：
● 推荐使用Tris-Glycine系统时，常配制10×贮存液，使用时稀释至1×。务必确认pH值（通常为8.3）。
● 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用新配置的电泳缓冲液。
● 可备有pH试纸或便携pH计，电泳前快速检测缓冲液pH是否异常。
阳极端缓冲液必须足量，以满足整个电泳过程的离子导通与缓冲需求。但值得注意的是：阳极端与阴极端液面绝对不能相连，否则会导致短路，电流异常升高，瞬间发热烧胶。
进阶建议：
● 建议两侧液面高度差保持在 1 cm 以上，并确保电泳槽放置平稳。
● 电泳前可目视检查两侧液面是否独立，必要时用吸管稍作调整。
● 如果发现电泳仪电流显示异常飙升，应立即停止运行，检查是否漏液或短路。
低温会显著降低缓冲液中离子的迁移速率和缓冲体系的反应效率，使得局部电阻增大、产热增加，烧胶风险随之升高。
进阶建议：
● 冬季或空调房内实验前，可将缓冲液用恒温水浴锅预热至25–30℃，微波炉短时加热也可行，但需混匀并测温避免过热。如条件允许，可在电泳槽周围放置保温板或室温维持在20℃以上。
● 夏天实验时，可进行冰浴，避免电泳温度过高。
a. 胶体局部烧穿怎么办？
立即停止电泳，检查该区域是否有气泡、杂质或缓冲液不足。
b. 多次重复使用同一批次的电泳缓冲液容易烧胶?
是的，建议每次使用新配置的电泳缓冲液，特别是进行长时间或高电压电泳时。
c. 不同蛋白分子量范围是否需调整缓冲体系？
是的，大分子量蛋白电泳可使用Tris-Acetate体系，缓冲配方和电压也需相应调整。
你是不是也曾被电泳烧胶困扰？
👇欢迎在评论区分享：
➊ 你遇到过哪些奇葩的烧胶情况？
➋ 有没有自己总结的“防烧胶”小妙招？
➌ 还想了解哪些电泳相关的问题？
1. 关注公众号，领实验资料包➡️ 关注“万生昊天生物”，回复关键词“电泳缓冲液”，即可获取：
《电泳缓冲液配置黄金手册》
2. 加入实验交流群
👥扫码添加小助手微信（ID: wshtbio-Inc），备注“WB+单位”，即可进入蛋白实验技术交流群，与同行实时讨论！
3. 往期精选推荐
📚 如果你觉得本文有用，可能也会喜欢：
